在實(shí)驗(yàn)室使用高效液相色譜儀進(jìn)行分離之前，必須明確建立方法的基本思路和分析目的。主要包括如下幾個(gè)方面：

　　一、檢測(cè)目的。是對(duì)部分組分的定量分析、一種組分的檢出、樣品中未知組分的確認(rèn)或者純化分離。

　　二、分離目的。是否有必要解析出樣品中所有組分?

　　三、定量分析。準(zhǔn)確度與精密度的具體要求是什么?

　　四、樣品基質(zhì)。可能涉及的樣品基質(zhì)有幾種，樣品的存在形態(tài)也可能相同，是否需要建立不同的方法?

　　五、樣品量。需要分析的樣品批量是多少?需要綜合考慮方法的通量。

　　六、樣品預(yù)處理方式。樣品來源形成不同，預(yù)處理辦法也不同。包括：

　　1可直接進(jìn)樣的溶液;

　　2 需稀釋、加pH緩沖液、加內(nèi)標(biāo)或其他定容操作的溶液;

　　3需要首先溶解或提前處理的固體樣品;

　　4 需預(yù)處理以除去干擾物，避免色譜柱或一起損壞樣品。

　　七、裝備與人員條件。了解高效液相色譜儀設(shè)備、人員技能、色譜柱是否恒溫?HPLC系統(tǒng)能否進(jìn)行梯度洗脫?